期刊简介
本刊为口腔医学专业学术性刊物。主要反映我国口腔医学工作者在防病治病、科学研究及教学等工作中取得的成果，发表口腔医学基础研究和临床研究方面的论文、调查报告、病例报告，报道研究动态。
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首页>华西口腔医学杂志
- 杂志名称：华西口腔医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：四川大学
- 国际刊号：1000-1182
- 国内刊号：51-1169/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
人釉原蛋白基因在大肠杆菌中的融合表达
张雪洋；赵华；赵红宇；王春先；章锦才
关键词：人釉原蛋白, 融合蛋白, 纯化
摘要：目的 建立人釉原蛋白(AMG)成熟肽基因在大肠杆菌中融合表达和纯化的技术路线.方法 利用已构建并经鉴定的重组质粒pGEX-4T-1/AMG转化大肠杆菌BL21,分别对诱导时间、异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)浓度和诱导温度进行优化,在佳诱导表达条件下,分别对菌液上清、周质、胞质和包涵体中的目的 蛋白表达进行分析,在可溶性蛋白中发现大量目的 蛋白,随后利用GSTrapFF亲和层析柱进行人AMG融合蛋白的过柱纯化.结果 pGEX-4T-1/AMG重组质粒的双酶切凝胶电泳鉴定结果和测序鉴定结果和预期一致.佳诱导时间为14.5 h、佳诱导剂浓度为1.0mmol/L、佳诱导温度为20℃,在此条件下目的 蛋白的表达量达到峰值.在佳诱导条件下,胞质蛋白和包涵体中都有大量的目的 蛋白.提取大量胞质蛋白,经GSTrapFF亲和层析柱纯化,收集纯化液,进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,显示成功纯化TAMG融合蛋白,在提取液洗涤2次后,可获得高纯度的融合蛋白.结论 利用pGEX-4T-1/AMG原核表达体系成功获得纯化的人AMG融合蛋白.
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