期刊简介

               本刊为口腔医学专业学术性刊物。主要反映我国口腔医学工作者在防病治病、科学研究及教学等工作中取得的成果,发表口腔医学基础研究和临床研究方面的论文、调查报告、病例报告,报道研究动态。                

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  • 杂志名称:华西口腔医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 国际刊号:1000-1182
  • 国内刊号:51-1169/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
华西口腔医学杂志2016年第05期

慢病毒介导过表达端粒酶逆转录酶的人口腔黏膜上皮稳定细胞系的构建

曾飒;秦晓东;何祥一;车春晓;张潇;解斯羽;孙贵军;王立鹤

关键词:口腔黏膜上皮细胞, 人端粒酶逆转录酶, 慢病毒载体, 稳定表达, 永生化
摘要:目的 通过慢病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的口腔黏膜上皮细胞(OMECs),探索构建高效、稳定的永生化OMECs细胞系的方法.方法 提取293T细胞总RNA,应用聚合酶链反应(PCR)法扩增hTERT基因全长,构建重组慢病毒载体pLVX-puro-hTERT.包装慢病毒颗粒后感染人正常OMECs,经嘌呤霉素抗性筛选获得阳性克隆,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测hTERT基因mRNA和蛋白的表达水平.结果 成功构建了pLVX-puro-hTERT过表达慢病毒载体并感染到OMECs中;感染细胞与正常OMECs形态相似,呈铺路石样生长;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示,hTERT在感染细胞中高表达,与正常细胞相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 通过慢病毒法成功建立了过表达hTERT的OMECs稳定细胞系,为构建高效、稳定增殖的人永生化OMECs细胞系奠定了实验基础.