期刊简介

               本刊为口腔医学专业学术性刊物。主要反映我国口腔医学工作者在防病治病、科学研究及教学等工作中取得的成果,发表口腔医学基础研究和临床研究方面的论文、调查报告、病例报告,报道研究动态。                

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  • 杂志名称:华西口腔医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 国际刊号:1000-1182
  • 国内刊号:51-1169/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
华西口腔医学杂志2016年第03期

生物钟基因Per1对人口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、细胞周期和体内成瘤的影响及机理

付小娟;杨凯;李晗雪;赵钦;陈丹

关键词:生物钟, Per1, 细胞周期, 基因, 口腔癌
摘要:目的:探讨生物钟基因Per1对细胞周期相关基因的调控作用,以及对人口腔鳞状细胞癌细胞SCC15增殖、凋亡、细胞周期和体内成瘤的影响。方法构建3组针对Per1?RNA的短发夹RNA(shRNA)慢病毒重组质粒,转染SCC15细胞,用蛋白质印迹法(Western?blot)及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测筛选RNA干扰作用强组为实验组,对照组(Control-shRNA)为对任何基因均无干扰效应的shRNA序列的质粒,空白组为未做任何处理的SCC15细胞。用qRT-PCR检测各组细胞中细胞周期相关基因Per1、p53、Cyclin?D1、Cyclin?E、Cyclin?A2、Cyclin?B1、CDK1、CDK2、CDK4、CDK6、p16、p21、Wee1、cdc25、E2F、Rb1?mRNA的表达;用流式细胞仪检测各组细胞增殖、凋亡和细胞周期分布;将实验组和空白组细胞分别接种于裸鼠背部皮下,观察成瘤情况。结果成功构建了3组Per1-shRNA慢病毒质粒,通过qRT-PCR和Western?blot证明Per1-shRNA-Ⅰ组沉默效果佳,作为实验组。Per1-shRNA-Ⅰ组中Cyclin?D1、Cyclin?E、Cyclin?B1、CDK1和Wee1?mRNA的表达水平高于Control-shRNA组和SCC15组(P<0.05),p53、Cyclin?A2、p16、p21和cdc25?mRNA的表达水平降低(P<0.05);Control-shRNA组和SCC15组中各基因mRNA的表达水平无差异(P>0.05)。CDK2、CDK4、CDK6、E2F和Rb1?mRNA的表达水平在3组中均无统计学差异(P>0.05)。Per1-shRNA-Ⅰ组中细胞增殖指数高于Control-shRNA组和SCC15组(P<0.05),凋亡指数降低(P<0.05),S期的细胞数降低(P<0.05),G2/M期的细胞数增加(P<0.05)。Control-shRNA组和SCC15组细胞的增殖指数和凋亡指数无统计学差异(P>0.05)。Per1-shRNA-Ⅰ组细胞体内成瘤能力显著增强(P<0.05)。结论生物钟基因Perl是重要的抑癌基因,Perl能调控下游众多的细胞周期基因,其表达变化影响细胞周期进程、增殖和凋亡的平衡失调及体内成瘤能力,对Per1深入研究有可能进一步明确癌症的发生发展机制,为癌症的治疗提供新的有效分子靶点。